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胚胎的解冻与冷冻相反，是将胚胎从超低温状态下恢复至正常生理状态的过程。解冻主要有两个过程，一个是复温，一个是去除冷冻保护剂，最终达到恢复胚胎生理活性及继续发育的目的。复温一般采用较快的升温速度，避免在中间产生一些冰晶对胚胎造成损伤，胚胎冷冻时，胚胎中渗透了高浓度的冷冻保护剂，复温后需及时将其去除，使水分能替代保护剂渗入细胞内，因此解冻剂中含有一些非渗透性保护剂，胚胎可逐步吸收水分，并将冷冻剂从胚胎细胞中渗出，且不会因水分吸收过快而导致细胞膜内外渗透压剧烈变化，对胚胎造成损伤。胚胎解冻时选择何种方法需依据胚胎冷冻时选择的方法，不同的冷冻方法不仅冷冻原理有差别，且胚胎装载的方式也完全不同，因此解冻时也需采用不同的解冻方法和程序，如胚胎冷冻常用两种方法，一种是程序冷冻法，一种是玻璃化冷冻法。在程序冷冻法中，胚胎是装载在充满冷冻液的冷冻管中，降温过程也是按照一定的速率较缓慢的降到一个稳定的温度，约在-35℃到-80℃之间，再投入液氮，整个过程大概需两个小时，解冻时也需用程序的解冻法，复温的速度虽要求较快，但为避免体积和温度急剧变化导致胚胎受损，则需将冷冻管从液氮取出后，先在空气中停留一段时间，然后再升温到37℃，而玻璃化冷冻时，胚胎是在高浓度的冷冻保护剂中进行短时间平衡后，使用极少量的保护剂，再将它们装载在导热性较好的载体上，直接被投入液氮中，胚胎瞬间被冷冻，从生理温度降至-196℃，整个冷冻过程仅7-8分钟，玻璃化解冻时复苏温度也极快，胚胎从液氮中取出后，立即从-196℃直接升温至生理温度。总之，解冻方法需与冷冻时的方法相对应，这样更有利于胚胎的复苏及生理功能的恢复，不恰当的复苏方法会对胚胎造成较大的损伤。