新生儿溶血病需要进行母子血型检查、呼出气一氧化碳含量的测定、改良直接抗人球蛋白试验、抗体释放试验以及游离抗体试验等。

1、母子血型检查：检查母子ABO和Rh血型，证实有血型不合存在；

2、呼出气一氧化碳含量的测定：血红素在形成胆红素的过程中会释放出一氧化碳。测定呼出气中一氧化碳的含量可以反映胆红素生成的速度，因此在溶血症患儿可用以预测发生重度高胆红素血症的可能。若没有条件测定，检测血液中碳氧血红蛋白水平也可作为胆红素生成的情况的参考；

3、改良直接抗人球蛋白试验：即改良抗人球蛋白试验，是用“最适稀释度”的抗人球蛋白血清与充分洗涤后的受检红细胞盐水悬液混合，如有红细胞凝聚为阳性，表明红细胞已致敏，该项为确诊试验。Rh溶血病其阳性率高而ABO溶血病阳性率低；

4、抗体释放试验：通过加热使患儿血中致敏红细胞的血型抗体释放于释放液中，将与患儿相同血型的成人红细胞（ABO系统）或O型标准红细胞（Rh系统）加入释放液中致敏，再加入抗人球蛋白血清，如有红细胞凝聚为阳性。是检测致敏红细胞的敏感试验，也为确诊试验。Rh和ABO溶血病一般均为阳性；

5、游离抗体试验：在患儿血清中加入与其相同血型的成人红细胞（ABO系统）或O型标准红细胞（Rh系统）致敏，再加入抗人球蛋白血清，如有红细胞凝聚为阳性。表明血清中存在游离的ABO或Rh血型抗体，并可能与红细胞结合引起溶血。此项试验有助于估计是否继续溶血、换血后的效果，但不是确诊试验。

此外，还需检查有无溶血，溶血时红细胞和血红蛋白减少，早期新生儿血红蛋白<145g/L可诊断为贫血、网织红细胞增高（>6%）、血涂片有核红细胞增多（>10/10个白细胞）、球形红细胞增多、血清总胆红素和未结合胆红素明显增加。